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显微镜观察检测细胞活细胞对光线是透明的,光线通过活细胞时,波长和振幅几乎没有改变,所以用普通光镜无法看清未经染色的活细胞。20世纪30年代 荷兰 Zernike 相差显微镜观察活细胞的步骤如下(1)调整好相差显微镜(2)观察瓶皿准备(3)调光; 细胞的生长状态生长良好的细胞,在显微镜下可观察到细胞透明度大,折光性强,轮廓不清。 若细胞生长状态不良,可见细胞轮廓增强,细胞折光性变弱,细胞胞质中出现空泡、脂滴和其他颗粒状物质,细胞之间空隙增大,细胞形态不规则,甚至失去原有细胞的特点,产生圆缩脱落,有时细胞表面及周围出现丝絮状物。
各种细胞及各代细胞增殖的时间不尽相同。 一旦发现细胞长满瓶底80%就应及时传代,否则会影响细胞生长甚至脱落。
注意事项
活细胞的观察检测方法 1、暗视野显微镜技术观察活细胞
原理:利用特殊聚光器使光线不能进入物镜,经过标本的散射光线使物镜被放大,因此在黑暗背景中可呈现明亮的像。 优点:反差增大,分辨率提高,可观察到5nm的微小质点。 应用:观察活细胞内的细胞核、线粒体、细菌和霉菌等。 2.缩时显微摄影术观察 优点:可直接记录活细胞的连续动态变化过程,能非常直观地展现细胞生长过程中的动态变化,如细胞运动、细胞分裂、细胞膜变化、细胞死亡等过程。 3.体外活细胞染色观察 体外活细胞染色就是在体外培养条件下,用某种染料对活细胞进行染色,而不影响活细胞生命活动的一种方法。利用这种方法,可以对培养物进行染色观察,经染色的培养物还可以继续进行培养。 文章出自:科信仪器 转载时必须以链接形式注明作者和原始出处及本声明。
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